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Calcein-AM/PI活死細(xì)胞染色試劑 細(xì)胞培養(yǎng)

  • 產(chǎn)品價(jià)格:468
  • 更新時(shí)間:2024-04-24

簡(jiǎn)要描述:Calcein-AM/PI活死細(xì)胞染色試劑 細(xì)胞培養(yǎng)
本產(chǎn)品含有Calcein-AM和PI兩種組分。Calcein-AM是一種對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,其熒光呈綠色(Ex=490nm, Em=515nm)。

產(chǎn)品詳情
品牌YOBIBIO/攸碧艾貨號(hào)U23-002A
規(guī)格500T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng),檢測(cè)細(xì)胞活性,細(xì)胞染色應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

本產(chǎn)品含有Calcein-AM和PI兩種組分。Calcein-AM是一種對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,其熒光呈綠色(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在傳統(tǒng)的Calcein(鈣黃綠素)基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團(tuán),增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。一旦進(jìn)入細(xì)胞后,Calcein-AM(本身不發(fā)熒光)被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)并發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。由于死細(xì)胞缺乏酯酶,Calcein-AM僅用于對(duì)活細(xì)胞的細(xì)胞生存能力測(cè)試和短期標(biāo)記。因此,Calcein-AM常常與死細(xì)胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯(lián)合使用,同時(shí)進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿過活細(xì)胞的細(xì)胞膜,僅能穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(Ex=535 nm, Em=615 nm),因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。

本產(chǎn)品中Calcein-AM濃度為:1 mM,建議工作濃度1~10 μM;PI濃度為:1 mM,建議工作濃度1~10 μM;

使用方法(僅供參考):

1.Calcein-AM/PI工作液配制:(推薦Calcein-AM: 2 μM, PI: 4 μM) 分別取10 μl的Calcein-AM和20 μl的PI儲(chǔ)存溶液,加入至5 ml的PBS中,充分混勻,備用; 【注意】:由于Calcein-AM的穩(wěn)定性比較差,此染色工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用,并且在當(dāng)天用完。 Calcein-AM和PI的最佳濃度是因不同的細(xì)胞種類而定,初次實(shí)驗(yàn)建議做梯度實(shí)驗(yàn),以確定Calcein-AM和PI的最適濃度。
2.染色前先用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3.加入適量的Calcein-AM/PI工作液(貼壁細(xì)胞覆蓋即可),在培養(yǎng)箱中孵育15-30 min;
4.用PBS或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞兩次;
5.熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞染色結(jié)果, Calcein-AM檢測(cè)波長:Ex=490nm(藍(lán)光激發(fā)), Em=515nm;PI檢測(cè)波長:Ex=535 nm(綠光激發(fā)), Em=615 nm; 儲(chǔ)存條件 -20oC保存, 一年有效;
僅供科學(xué)研究使用 注意事項(xiàng):
1.使用前先將低溫保存的試劑在室溫條件下放置20-30 min。
2.由于Calcein-AM對(duì)濕度非常敏感,工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
3.第一次使用可對(duì)儲(chǔ)存液進(jìn)行分裝,以減少反復(fù)凍融次數(shù)。
4.血清的存在可能會(huì)干擾Calcein-AM染色,染色前請(qǐng)先用PBS洗滌細(xì)胞。
5.碘化丙啶(PI)有一定的致癌性,操作時(shí)一定要注意防護(hù)。若接觸到皮膚,需要立即用自來水清洗。
6.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

 
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